Ocena odpowiedzi immunogennej na nowatorską szczepionkę z koniugatem enterobaktyny u kurcząt do produkcji przeciwciał żółtka jaja gwinicznych dla enterobaktyny
Bierna immunizacja specyficznymi przeciwciałami żółtka jaja (immunoglobulina Y, IgY) staje się obiecującą alternatywą dla antybiotyków do zwalczania infekcji bakteryjnych. Niedawno opracowaliśmy nową szczepionkę skoniugowaną, która może wywołać u królików silną odpowiedź immunologiczną skierowaną przeciwko enterobaktynie (Ent), wysoce konserwatywnej cząsteczce sideroforu wykorzystywanej przez różne patogeny Gram-ujemne. Jednak wydaje się, że na indukcję przeciwciał swoistych dla Ent wpływa wybór żywiciela zwierzęcego i reżim szczepień.
Nadal nie wiadomo, czy skoniugowana szczepionka Ent może wywołać specyficzną odpowiedź immunologiczną u niosek w celu wytworzenia przeciwciał IgY przeciwko żółtku jaja Ent. W tym badaniu przeprowadzono trzy próby szczepienia kurczaków z różnymi schematami w celu określenia warunków wydajnej produkcji przeciwciał IgY przeciwko żółtku jaja Ent . Oczyszczony Ent skoniugowano odpowiednio z trzema białkami nośnikowymi, hemocyjaniną skałoczepa (KLH), albuminą surowicy bydlęcej (BSA) i CmeC (kandydatem na podjednostkową szczepionkę).
Domięśniowa immunizacja warstw Barred Rock koniugatem KLH-Ent czterokrotnie wywołała silną odpowiedź immunologiczną przeciwko całej szczepionce skoniugowanej, ale miano przeciwciał IgY swoistych dla Ent nie zmieniło się w żółtku z jedynie 4-krotnym wzrostem w surowicy. W drugim badaniu oceniono trzy różne skoniugowane szczepionki Ent u kurek rasy Rhode Island Purple z czterema wstrzyknięciami podskórnymi. Koniugat KLH-Ent lub CmeC-Ent konsekwentnie indukował wysoki poziom przeciwciał IgY swoistych dla Ent zarówno w surowicy (do 2048 razy), jak iw żółtku (do 1024 razy) u każdego kurczaka . Jednak specyficzna dla Ent odpowiedź immunologiczna była wywoływana tylko tymczasowo i umiarkowanie za pomocą szczepienia BSA-Ent.
W trzecim badaniu dziesięć niosek rasy White Leghorn immunizowano podskórnie trzykrotnie KLH-Ent, co doprowadziło do spójnej i silnej odpowiedzi immunologicznej przeciwko zarówno całemu koniugatowi, jak i cząsteczce Ent u każdego kurczaka; średnie miano przeciwciał IgY swoistych dla Ent wzrosło odpowiednio o około 32 i 256 razy w surowicy i żółtku. Zgodnie z silnym wiązaniem z różnymi pochodnymi Ent, specyficzne dla Ent IgY żółtka jaja hamowały również wzrost in vitro reprezentatywnego szczepu Escherichia coli .
W sumie to badanie wykazało, że nowatorska szczepionka skoniugowana Ent może wywołać silną, specyficzną i silną odpowiedź immunologiczną u kurczaków. Specyficzne dla Entów hiperimmunizacyjne IgY żółtka jaja mają potencjał do biernej interwencji immunologicznej przeciwko infekcjom Gram-ujemnym.
Description: Quantitative sandwich ELISA for measuring Human Tubulin beta-4 chain (TUBB4) in samples from cell culture supernatants, serum, whole blood, plasma and other biological fluids.
Description: Quantitative sandwich ELISA for measuring Human Tubulin beta-4 chain (TUBB4) in samples from cell culture supernatants, serum, whole blood, plasma and other biological fluids.
Description: Quantitative sandwich ELISA for measuring Human Tubulin beta-4 chain (TUBB4) in samples from cell culture supernatants, serum, whole blood, plasma and other biological fluids.
Description: TUBB1 is a gene that codes for the protein Tubulin beta-1 chain in humans. This gene encodes a member of the beta tubulin protein family. Beta tubulins are one of two core protein families (alpha and beta tubulins) that heterodimerize and assemble to form microtubules. This protein is specifically expressed in platelets and megakaryocytes and may be involved in proplatelet production and platelet release. A mutations in this gene is associated with autosomal dominant macrothrombocytopenia. Two pseudogenes of this gene are found on chromosome Y.
Description: This gene encodes a class III member of the beta tubulin protein family. Beta tubulins are one of two core protein families (alpha and beta tubulins) that heterodimerize and assemble to form microtubules. This protein is primarily expressed in neurons and may be involved in neurogenesis and axon guidance and maintenance. Mutations in this gene are the cause of congenital fibrosis of the extraocular muscles type 3.In adults, tubulin beta 3 (TUBB3) is primarily expressed in neurons and is commonly used as a neuronal marker. It plays an important role in neuronal cell proliferation and differentiation.
Description: This gene encodes a class III member of the beta tubulin protein family. Beta tubulins are one of two core protein families (alpha and beta tubulins) that heterodimerize and assemble to form microtubules. This protein is primarily expressed in neurons and may be involved in neurogenesis and axon guidance and maintenance. Mutations in this gene are the cause of congenital fibrosis of the extraocular muscles type 3.In adults, tubulin beta 3 (TUBB3) is primarily expressed in neurons and is commonly used as a neuronal marker. It plays an important role in neuronal cell proliferation and differentiation.
Description: This gene encodes a class III member of the beta tubulin protein family. Beta tubulins are one of two core protein families (alpha and beta tubulins) that heterodimerize and assemble to form microtubules. This protein is primarily expressed in neurons and may be involved in neurogenesis and axon guidance and maintenance. Mutations in this gene are the cause of congenital fibrosis of the extraocular muscles type 3.In adults, tubulin beta 3 (TUBB3) is primarily expressed in neurons and is commonly used as a neuronal marker. It plays an important role in neuronal cell proliferation and differentiation.
Description: This gene encodes a class III member of the beta tubulin protein family. Beta tubulins are one of two core protein families (alpha and beta tubulins) that heterodimerize and assemble to form microtubules. This protein is primarily expressed in neurons and may be involved in neurogenesis and axon guidance and maintenance. Mutations in this gene are the cause of congenital fibrosis of the extraocular muscles type 3.In adults, tubulin beta 3 (TUBB3) is primarily expressed in neurons and is commonly used as a neuronal marker. It plays an important role in neuronal cell proliferation and differentiation.
Description: This gene encodes a class III member of the beta tubulin protein family. Beta tubulins are one of two core protein families (alpha and beta tubulins) that heterodimerize and assemble to form microtubules. This protein is primarily expressed in neurons and may be involved in neurogenesis and axon guidance and maintenance. Mutations in this gene are the cause of congenital fibrosis of the extraocular muscles type 3.In adults, tubulin beta 3 (TUBB3) is primarily expressed in neurons and is commonly used as a neuronal marker. It plays an important role in neuronal cell proliferation and differentiation.
Description: This gene encodes a class III member of the beta tubulin protein family. Beta tubulins are one of two core protein families (alpha and beta tubulins) that heterodimerize and assemble to form microtubules. This protein is primarily expressed in neurons and may be involved in neurogenesis and axon guidance and maintenance. Mutations in this gene are the cause of congenital fibrosis of the extraocular muscles type 3.In adults, tubulin beta 3 (TUBB3) is primarily expressed in neurons and is commonly used as a neuronal marker. It plays an important role in neuronal cell proliferation and differentiation.
Description: Tubulin is the major constituent of microtubules. It binds two moles of GTP, one at an exchangeable site on the beta chain and one at a non-exchangeable site on the alpha chain. TUBB3 plays a critical role in proper axon guidance and mantainance. Binding of NTN1/Netrin-1 to its receptor UNC5C might cause dissociation of UNC5C from polymerized TUBB3 in microtubules and thereby lead to increased microtubule dynamics and axon repulsion. Plays a role in dorsal root ganglion axon projection towards the spinal cord. [UniProt]
Description: Tubulin is the major constituent of microtubules. It binds two moles of GTP, one at an exchangeable site on the beta chain and one at a non-exchangeable site on the alpha chain. TUBB3 plays a critical role in proper axon guidance and mantainance. Binding of NTN1/Netrin-1 to its receptor UNC5C might cause dissociation of UNC5C from polymerized TUBB3 in microtubules and thereby lead to increased microtubule dynamics and axon repulsion. Plays a role in dorsal root ganglion axon projection towards the spinal cord. [UniProt]
Description: Tubulin is the major constituent of microtubules. It binds two moles of GTP, one at an exchangeable site on the beta chain and one at a non-exchangeable site on the alpha chain. TUBB3 plays a critical role in proper axon guidance and mantainance. Binding of NTN1/Netrin-1 to its receptor UNC5C might cause dissociation of UNC5C from polymerized TUBB3 in microtubules and thereby lead to increased microtubule dynamics and axon repulsion. Plays a role in dorsal root ganglion axon projection towards the spinal cord. [UniProt]
Description: Tubulin is the major constituent of microtubules. It binds two moles of GTP, one at an exchangeable site on the beta chain and one at a non-exchangeable site on the alpha chain.
Description: Tubulin is the major constituent of microtubules. It binds two moles of GTP, one at an exchangeable site on the beta chain and one at a non-exchangeable site on the alpha chain.
Description: The TUBB gene encodes a beta tubulin protein. This protein forms a dimer with alpha tubulin and acts as a structural component of microtubules. Mutations in this gene cause cortical dysplasia, complex, with other brain malformations 6. Alternative splicing results in multiple splice variants. There are multiple pseudogenes for this gene on chromosomes 1, 6, 7, 8, 9, and 13. [RefSeq]
Description: Tubulin beta chain is a protein that in humans is encoded by the TUBB gene. This gene encodes a beta tubulin protein. This protein forms a dimer with alpha tubulin and acts as a structural component of microtubules. Mutations in this gene cause cortical dysplasia, complex, with other brain malformations 6. Alternative splicing results in multiple splice variants. There are multiple pseudogenes for this gene on chromosomes 1, 6, 7, 8, 9, and 13.
Description: Beta tubulins are one of two core protein families (alpha and beta tubulins) that heterodimerize and assemble to form microtubules. Tubulin beta-1 chain (TUBB1) is specifically expressed in platelets and megakaryocytes and may be involved in proplatelet production and platelet release.
Description: This gene encodes a member of the beta tubulin protein family. Beta tubulins are one of two core protein families (alpha and beta tubulins) that heterodimerize and assemble to form microtubules. Tubulin beta-1 chain is specifically expressed in platelets and megakaryocytes and may be involved in proplatelet production and platelet release. A mutations in this gene is associated with autosomal dominant macrothrombocytopenia. Two pseudogenes of this gene are found on chromosome Y.
Description: Tubulin is the major constituent of microtubules. It binds two moles of GTP, one at an exchangeable site on the beta chain and one at a non-exchangeable site on the alpha chain.
Description: Tubulin is the major constituent of microtubules. It binds two moles of GTP, one at an exchangeable site on the beta chain and one at a non-exchangeable site on the alpha-chain (By similarity).
Description: Tubulin is the major constituent of microtubules. It binds two moles of GTP, one at an exchangeable site on the beta chain and one at a non-exchangeable site on the alpha-chain (By similarity).
Description: Tubulin is the major constituent of microtubules. It binds two moles of GTP, one at an exchangeable site on the beta chain and one at a non-exchangeable site on the alpha-chain (By similarity).
Description: Tubulin is the major constituent of microtubules. It binds two moles of GTP, one at an exchangeable site on the beta chain and one at a non-exchangeable site on the alpha-chain (By similarity).
Description: Beta III tubulin is abundant in the central and peripheral nervous systems (CNS and PNS) where it is prominently expressed during fetal and postnatal development. As exemplified in cerebellar and sympathoadrenal neurogenesis, the distribution of beta III is neuron-associated, exhibiting distinct temporospatial gradients according to the regional neuroepithelia of origin. However, transient expression of this protein is also present in the subventricular zones of the CNS comprising putative neuronal- and/or glial precursor cells, as well as in Kulchitsky neuroendocrine cells of the fetal respiratory epithelium. This temporally restricted, potentially non-neuronal expression may have implications in the identification of presumptive neurons derived from embryonic stem cells.
Description: Tubulin beta-3 chain is a protein that in humans is encoded by the TUBB3 gene. This gene encodes a class III member of the beta tubulin protein family. Beta tubulins are one of two core protein families (alpha and beta tubulins) that heterodimerize and assemble to form microtubules. This protein is primarily expressed in neurons and may be involved in neurogenesis and axon guidance and maintenance. Mutations in this gene are the cause of congenital fibrosis of the extraocular muscles type 3. Alternate splicing results in multiple transcript variants. A pseudogene of this gene is found on chromosome 6.
Description: Tubulin is the major constituent of microtubules. It binds two moles of GTP, one at an exchangeable site on the beta chain and one at a non-exchangeable site on the alpha-chain (By similarity).
Description: Tubulin is the major constituent of microtubules. It binds two moles of GTP, one at an exchangeable site on the beta chain and one at a non-exchangeable site on the alpha-chain (By similarity).
Description: Tubulin is the major constituent of microtubules. It binds two moles of GTP, one at an exchangeable site on the beta chain and one at a non-exchangeable site on the alpha chain (By similarity).
Description: Tubulin is the major constituent of microtubules. It binds two moles of GTP, one at an exchangeable site on the beta chain and one at a non-exchangeable site on the alpha chain (By similarity).
Description: Tubulin is the major constituent of microtubules. It binds two moles of GTP, one at an exchangeable site on the beta chain and one at a non-exchangeable site on the alpha-chain.
Description: Tubulin is the major constituent of microtubules. It binds two moles of GTP, one at an exchangeable site on the beta chain and one at a non-exchangeable site on the alpha-chain.
Description: The protein encoded by this gene is a beta isoform of tubulin, which binds GTP and is a major component of microtubules. This gene is highly similar to TUBB2A and TUBB2C. Defects in this gene are a cause of asymmetric polymicrogyria. [provided by RefSeq].
Description: The protein encoded by this gene is a beta isoform of tubulin, which binds GTP and is a major component of microtubules. This gene is highly similar to TUBB2A and TUBB2C. Defects in this gene are a cause of asymmetric polymicrogyria. [provided by RefSeq].
Description: Tubulin is the major constituent of microtubules. It binds two moles of GTP, one at an exchangeable site on the beta chain and one at a non-exchangeable site on the alpha-chain (By similarity).
Description: Tubulin is the major constituent of microtubules. It binds two moles of GTP, one at an exchangeable site on the beta chain and one at a non-exchangeable site on the alpha-chain (By similarity).
Description: TUBB2C is the major constituent of microtubules. It binds two moles of GTP, one at an exchangeable site on the beta chain and one at a non-exchangeable site on the alpha-chain.
Description: TUBB2C is the major constituent of microtubules. It binds two moles of GTP, one at an exchangeable site on the beta chain and one at a non-exchangeable site on the alpha-chain.
Description: Beta III tubulin is abundant in the central and peripheral nervous systems (CNS and PNS) where it is prominently expressed during fetal and postnatal development. As exemplified in cerebellar and sympathoadrenal neurogenesis, the distribution of beta III is neuron-associated, exhibiting distinct temporospatial gradients according to the regional neuroepithelia of origin. However, transient expression of this protein is also present in the subventricular zones of the CNS comprising putative neuronal- and/or glial precursor cells, as well as in Kulchitsky neuroendocrine cells of the fetal respiratory epithelium. This temporally restricted, potentially non-neuronal expression may have implications in the identification of presumptive neurons derived from embryonic stem cells.
Description: A polyclonal antibody raised in Rabbit that recognizes and binds to Human TUBB / Beta Tubulin . This antibody is tested and proven to work in the following applications:
Description: A Monoclonal antibody against Human TUBB / Beta Tubulin. The antibodies are raised in Mouse. This antibody is applicable in WB and IHC-P, IF
Description: Recombinant Human Tubulin beta-2A chain(TUBB2A) expressed in Yeast
×
Nowatorski automatyczny check immunologiczny dla przeciwciał NY-ESO-1 i XAGE1 w surowicy w skojarzonym przewidywaniu odpowiedzi na terapię przeciw zaprogramowanej komórkowej – 1 w niedrobnokomórkowym raku płuca
Tło: anty-zaprogramowana śmierć komórki 1 (PD-1) przeciwciała (ABS) są podstawowymi lekami w niedrobnokomórkowym rakiem płuc obróbki (NSCLC); jednakże korzyści kliniczne związane z monoterapią anty-PD-1 są ograniczone. Poinformowaliśmy, że przeciwciała Abs w surowicy przeciwko antygenom jąder nowotworowych NY-ESO-1 i XAGE1 przewidywały korzyści kliniczne. Naszym celem było opracowanie w pełni zautomatyzowanego systemu immunologicznego mierzącego NY-ESO-1 / XAGE1 Abs.
Metody: Surowice od 30 pacjentów z NSCLC przed monoterapią anty-PD-1 poddano reakcji z kulkami magnetycznymi pokrytymi rekombinowanym białkiem NY-ESO-1 lub syntetycznym peptydem XAGE1. Dodano Ab skoniugowane z ALP i substrat chemiluminescencyjny i zmierzono luminescencję. Procedury te zautomatyzowano przy użyciu immunoenzymatycznego testu chemiluminescencyjnego o wysokiej czułości (HISCL TM ). Stabilność NY-ESO-1 / XAGE1 Ab badano w różnych warunkach. Dokładność przewidywania odpowiedzi oceniano przy użyciu obszaru pod krzywą operacyjną odbiornika (AUROC).
Wyniki: HISCL wykrył specyficzne przeciwciała NY-ESO-1 / XAGE1 w surowicy, których poziomy w testach ELISA i HISCL były silnie skorelowane. Poziomy Ab w HISCL były stabilne w czterech temperaturach, pięciu cyklach zamrażania / rozmrażania i długotrwałym przechowywaniu; poziomy nie były zakłócane przez zwykłe składniki krwi. Poziomy Ab u 15 osób z odpowiedzią na NSCLC na monoterapię anty-PD-1 były istotnie wyższe niż u niereagujących i zdrowych dawców. AUROC był najwyższy (0,91; 95% CI, 0,78-1,0) w predykcji kombinacyjnej z NY-ESO-1 / XAGE1 Abs.
Wniosek: Nasz system testów immunologicznych jest przydatny do przewidywania korzyści klinicznych związanych z terapią immunopunktową NSCLC
Korelacja odpowiedzi na szczepionki
Wprowadzenie: Reakcja humoralna na szczepienia jest bardzo zróżnicowana u poszczególnych osób. Nie ma dostępnych danych dotyczących korelacji między odpowiedziami na różne szczepionki. W tym badaniu zbadaliśmy korelację odpowiedzi przeciwciał między rutynowymi antygenami szczepionkowymi u niemowląt.
Metody: Jeden i siedem miesięcy po szczepieniach 6-miesięcznych i miesiąc po szczepieniach 12-miesięcznych stężenia przeciwciał przeciwko błonicy, tężcowi, krztuścowi, polio (serotypy 1-3), Haemophilus influenzae typ b (Hib), pneumokokom (13 serotypy), meningokoki C, odrę, świnkę i różyczkę za pomocą multipleksowych testów immunologicznych opartych na kulkach fluorescencyjnych. Dla korelacji odpowiedzi przeciwciał obliczono współczynniki korelacji rang Spearmana (ρ) z 95% przedziałami ufności (CI) między odpowiedziami na każdy antygen szczepionkowy.
Wyniki: Korelacja pomiędzy stężeniami przeciwciał przeciwko szczepieniom kończącym się w wieku 6 miesięcy była wyższa po miesiącu w porównaniu z siedmioma miesiącami po szczepieniu. Najsilniejsze korelacje w obu punktach czasowych zaobserwowano między odpowiedziami przeciwciał na różne serotypy polio, określone serotypy pneumokokowe oraz między odpowiedziami na antygeny szczepionki przeciw błonicy i pneumokokom (sprzężonym z toksoidem błoniczym). Korelacja między odpowiedziami na tężec, Hib, krztusiec, polio i inne antygeny szczepionkowe była słaba. Korelacja między przeciwciałami odpowiedzi na 12-miesięczne antygeny szczepionkowe były słabsze niż na 6-miesięczne antygeny zawarte w szczepionce i istniała ujemna korelacja między odpowiedziami na szczepionkę przeciw odrze, śwince, różyczce i nieżywymi antygenami szczepionkowymi (meningokok C, tężec i Hib). Występowała tylko słaba korelacja między odpowiedziami przeciwciał na szczepionki tego samego typu (np. Szczepionki ze sprzężonym polisacharydem lub toksoidem).
Wniosek: Korelacja między odpowiedziami przeciwciał na podobne antygeny w tej samej szczepionce (np. Różne serotypy bakterii lub wirusa), jak również odpowiedzi na antygeny sprzężone z podobnymi białkami nośnikowymi są silne. W przeciwieństwie do tego, korelacja między odpowiedziami na inne szczepionki jest słaba. Pomiar odpowiedzi przeciwciał na jeden lub kilka antygenów szczepionkowych nie zapewnia zatem wiarygodnego zastępczego markera odpowiedzi na niepowiązane szczepionki.
Białko mitochondrialne CMPK2 reguluje tworzenie komórek piankowatych wzmocnionych przez IFN alfa, potencjalnie przyczyniając się do przedwczesnej miażdżycy tętnic w SLE
Wstęp: Przedwczesna miażdżyca tętnic występuje u chorych na SLE; jednak mechanizmy pozostają niejasne. Zarówno maszyneria mitochondrialna, jak i prozapalna cytokina interferon alfa (IFN-α) potencjalnie przyczyniają się do procesów aterogennych w SLE. W tym miejscu badamy rolę mitochondrialnej białkowej kinazy cytydyny / monofosforanu urydyny 2 (CMPK2) w zdarzeniach pro-miażdżycowych, w których pośredniczy IFN-α.
Metody: Pomiary komórek piankowych przeprowadzono za pomocą barwienia czerwieni oleistej O, wychwytu Dil-oxLDL i metody BODIPY. Te poziomy mRNA i białka były mierzone qPCR i Western blot, odpowiednio. Izolację komórek T CD4 + i monocytów przeprowadzono za pomocą przeciwciał monoklonalnych skoniugowanych z mikrokulkami. Manipulację ekspresją białka prowadzono albo przez knock-down małej interferencji RNA (siRNA), albo knock-out CRISPR / Cas9. Ekspresję mitochondrialnych reaktywnych kind tlenu (mtROS) określono za pomocą cytometrii przepływowej i mikroskopii konfokalnej.
Wyniki: Tworzenie komórek piankowatych indukowane przez IFN-α i pobór Dil-oxLDL przez makrofagi. Oprócz IFN-α, kilka czynników wyzwalających miażdżycę tętnic, w tym trombina i IFN-γ, może indukować ekspresję CMPK2, która była podwyższona w limfocytach T CD4 + i monocytach CD14 + izolowanych od pacjentów z SLE w porównaniu z tymi wyizolowanymi z kontroli. Analiza podfrakcji komórkowych ujawniła, że CMPK2 był obecny zarówno we frakcji mitochondrialnej, jak i cytozolowej. Ekspresja CMPK2 indukowana przez IFN-α była hamowana przez inhibitory kinazy janusowej (JAK) half i kinazy tyrozynowej 2 (Tyk2). Zarówno knockdown, jak i knockout CMPK2 osłabiły tworzenie komórek piankowatych, w którym pośredniczy IFN-α, co obejmowało zmniejszenie ekspresji receptora zmiatacza klasy A (SR-A). CMPK2 reguluje również mtROS ze wzmocnionym IFN-α produkcja i aktywacja inflamasomu.
Wnioski: Badanie sugeruje, że CMPK2 odgrywa ważną rolę w pro-miażdżycowym działaniu IFN-α.
