Strukturalny wpływ glikodendrymerów rekrutujących przeciwciała (ARG) na cytotoksyczność przeciwnowotworową
Rekrutacja endogennych przeciwciał przeciwko komórkom rakowym stała się niezawodną przeciwnowotworową alternatywą immunoterapeutyczną w ciągu ostatniej dekady. Rzeczywiście wykazano, że kowalencyjne przyłączenie przeciwciał i modułów wiążących nowotwór (ABM i TBM) w jednej, dobrze zdefiniowanej syntetycznej cząsteczce sprzyja tworzeniu się oddziałującego trójskładnikowego kompleksu między przeciwciałami a komórką docelową, co zwykle skutkuje jednoczesnym zniszczenie komórek za pośrednictwem układu odpornościowego. We wstępnym badaniu opisaliśmy pierwsze przeciwciało Rekrutacja glikodendrymerów (ARG), łączenie cRGD jako ligandów dla linii komórek czerniaka M21 z ekspresją αVβ3 i Rha jako ligandu dla naturalnej IgM i wykazała, że wielowartościowość jest niezbędnym wymogiem do utworzenia tego kompleksu. W niniejszym badaniu zsyntetyzowaliśmy nową serię ARG składających się z ABM, tj. Samoskondensowanych ramnozylowanych cyklopeptydów i dendrymerów polilizynowych, które zostały sprzężone z TBM z lub bez odstępnika.
Doświadczenia z cytometrią przepływową i mikroskopią konfokalną z ludzką surowicą i różnymi liniami komórkowymi ujawniły, że geometria ABM znacząco wpływa na tworzenie trójskładnikowego kompleksu w M21, podczas gdy w BT 549 o niskiej ekspresji integryny nie występuje żadne znaczące wiązanie . Ponadto wykazujemy za pomocą testu żywotności komórek, że ARG indukują wysoki poziom cytotoksyczności wobec M21, co jest również w ścisłej korelacji ze strukturą ABM. W szczególności wykazaliśmy, że ARG łączący rdzeń cyklopeptydowy i rozgałęzienia, z lub bez przerywnika, indukuje 40-57% selektywnej cytotoksyczności wobec komórek M21 w obecności ludzkiej surowicy jako wyjątkowego źródła efektorów odporności. Na koniec podkreślamy również, że odstęp między ABM i TBM umożliwia zwiększenie cytotoksyczności pośredniczonej przez układ odpornościowy nawet przy ABM o niższej wartościowości.
Description: The 104D2 monoclonal antibody reacts with human CD117, a 145 kD single-pass type i membrane protein typically found on the surface of leukemias, embryonic stem cells, mesenchymal stem cells and mast cells.
XFD594 Anti-human CD117 Antibody *104D2, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The 104D2 monoclonal antibody reacts with human CD117, a 145 kD single-pass type i membrane protein typically found on the surface of leukemias, embryonic stem cells, mesenchymal stem cells and mast cells.
XFD594 Anti-human CD133 Antibody *293C3, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The 293C3 monoclonal antibody recognizes human CD133, a 120 kD transmembrane protein typically located on the surface of epithelials and fetal liver cells.
XFD594 Anti-human CD133 Antibody *293C3, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The 293C3 monoclonal antibody recognizes human CD133, a 120 kD transmembrane protein typically located on the surface of epithelials and fetal liver cells.
XFD594 Anti-human CD28 Antibody *CD28.2, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The 4H1 monoclonal antibody binds to human CD116, a 70 - 85 kD glycoprotein commonly located on the surface of endothelial precursors and macrophages.
XFD594 Anti-human CD116 Antibody *4H1, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The 4H1 monoclonal antibody binds to human CD116, a 70 - 85 kD glycoprotein commonly located on the surface of endothelial precursors and macrophages.
XFD594 Anti-human CD122 Antibody *TU27, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The 6H6 monoclonal antibody reacts with human CD123, a 70 kD member of the Ig superfamily frequently expressed on the surface of megakaryocytes and macrophages.
XFD594 Anti-human CD123 Antibody *6H6, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The 6H6 monoclonal antibody reacts with human CD123, a 70 kD member of the Ig superfamily frequently expressed on the surface of megakaryocytes and macrophages.
XFD594 Anti-human CD123 Antibody *12H7, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The 12H7 monoclonal antibody binds to human CD123, a 70 kD single-pass type I membrane protein often located on the surface of macrophages, hematopoietic progenitors and dendritic cells.
XFD594 Anti-human CD123 Antibody *12H7, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The 12H7 monoclonal antibody binds to human CD123, a 70 kD single-pass type I membrane protein often located on the surface of macrophages, hematopoietic progenitors and dendritic cells.
XFD594 Anti-human CD138 Antibody *MI15, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The MI15 monoclonal antibody reacts with human CD138, a 100 - 200 kD transmembrane protein typically expressed on the surface of b cells, plasma cells, epithelial cells and endothelial cells.
XFD594 Anti-human CD138 Antibody *MI15, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The MI15 monoclonal antibody reacts with human CD138, a 100 - 200 kD transmembrane protein typically expressed on the surface of b cells, plasma cells, epithelial cells and endothelial cells.
XFD594 Anti-human CD107 Antibody *H4B4, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The W7C5 monoclonal antibody binds with human CD109, a 162 kD transmembrane protein typically expressed on the surface of T cells and T cell lines.
XFD594 Anti-human CD109 Antibody *W7C5, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The W7C5 monoclonal antibody binds with human CD109, a 162 kD transmembrane protein typically expressed on the surface of T cells and T cell lines.
XFD594 Anti-human CD172 Antibody *B4B6, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The B4B6 monoclonal antibody binds to human CD172b, a 43 kD transmembrane protein often located on the surface of dendritic cells, myeloid cells and monocytes.
XFD594 Anti-human CD172 Antibody *B4B6, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The B4B6 monoclonal antibody binds to human CD172b, a 43 kD transmembrane protein often located on the surface of dendritic cells, myeloid cells and monocytes.
XFD594 Anti-human CD152 Antibody *BN13, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The BN13 monoclonal antibody binds to human CD152, a 33 kD transmembrane protein frequently expressed on the surface of B cells and T cells.
XFD594 Anti-human CD152 Antibody *BN13, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The BN13 monoclonal antibody binds to human CD152, a 33 kD transmembrane protein frequently expressed on the surface of B cells and T cells.
XFD594 Anti-human CD160 Antibody *BY55, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The BY55 monoclonal antibody recognizes human CD160, a 27 kD transmembrane protein typically located on the surface of natural killer cells and T cells.
XFD594 Anti-human CD160 Antibody *BY55, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The BY55 monoclonal antibody recognizes human CD160, a 27 kD transmembrane protein typically located on the surface of natural killer cells and T cells.
XFD594 Anti-human CD162 Antibody *TC2, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The 67D2 monoclonal antibody binds with human CD164, a transmembrane glycoprotein typically found on the surface of leukemias, ls and basophils.
XFD594 Anti-human CD164 Antibody *67D2, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The 67D2 monoclonal antibody binds with human CD164, a transmembrane glycoprotein typically found on the surface of leukemias, ls and basophils.
XFD594 Anti-human CD165 Antibody *SN2, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The SN2 monoclonal antibody recognizes human CD165, a glycoprotein typically expressed on the surface of monocytes, fibroblasts, T cells and thymocytes.
XFD594 Anti-human CD165 Antibody *SN2, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The SN2 monoclonal antibody recognizes human CD165, a glycoprotein typically expressed on the surface of monocytes, fibroblasts, T cells and thymocytes.
XFD594 Anti-human CD314 Antibody *1D11, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The 1D11 monoclonal antibody binds to human CD314, a transmembrane protein commonly found on the surface of natural killer cells and T cells.
XFD594 Anti-human CD314 Antibody *1D11, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The 1D11 monoclonal antibody binds to human CD314, a transmembrane protein commonly found on the surface of natural killer cells and T cells.
XFD594 Anti-human CD318 Antibody *CUB1, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The 5E8 monoclonal antibody reacts with human CD193, a transmembrane protein typically found on the surface of mononuclear phagocytes and platelets.
XFD594 Anti-human CD193 Antibody *5E8, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The 5E8 monoclonal antibody reacts with human CD193, a transmembrane protein typically found on the surface of mononuclear phagocytes and platelets.
XFD594 Anti-human CD267 Antibody *1A1, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The 1A1 monoclonal antibody binds with human CD267, a 32 kD single-pass type iii membrane protein typically found on the surface of meyloma cells and B cells.
XFD594 Anti-human CD267 Antibody *1A1, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The 1A1 monoclonal antibody binds with human CD267, a 32 kD single-pass type iii membrane protein typically found on the surface of meyloma cells and B cells.
XFD594 Anti-human CD268 Antibody *11C1, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The 3D1 monoclonal antibody reacts with human CD279, a 50 - 55 kD member of the Ig superfamily typically located on the surface of t cells and b cells.
XFD594 Anti-human CD279 Antibody *3D1, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The 3D1 monoclonal antibody reacts with human CD279, a 50 - 55 kD member of the Ig superfamily typically located on the surface of t cells and b cells.
XFD594 Anti-human CD279 Antibody *2E7, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The J116 monoclonal antibody binds to human CD279, a 50 - 55 kD member of the Ig superfamily commonly located on the surface of B cells and thymocytes.
XFD594 Anti-human CD279 Antibody *J116, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The J116 monoclonal antibody binds to human CD279, a 50 - 55 kD member of the Ig superfamily commonly located on the surface of B cells and thymocytes.
XFD594 Anti-human CD253 Antibody *2E5, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The UIC2 monoclonal antibody recognizes human CD243, a 170 kD member of the Member of ABC transporter family typically located on the surface of hematopoietic stem cells, T cells, natural killer cells and B cells.
XFD594 Anti-human CD243 Antibody *UIC2, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The UIC2 monoclonal antibody recognizes human CD243, a 170 kD member of the Member of ABC transporter family typically located on the surface of hematopoietic stem cells, T cells, natural killer cells and B cells.
XFD594 Anti-mouse CD197 Antibody *4B12, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The HLy9.25 monoclonal antibody reacts with human CD229, a 100 - 120 kD transmembrane protein frequently found on the surface of thymocytes, B cells, T cells and natural killer cells.
XFD594 Anti-human CD229 Antibody *HLy9.25, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The HLy9.25 monoclonal antibody reacts with human CD229, a 100 - 120 kD transmembrane protein frequently found on the surface of thymocytes, B cells, T cells and natural killer cells.
XFD594 Anti-human CD231 Antibody *B2D, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The B2D monoclonal antibody binds with human CD231, a transmembrane protein frequently found on the surface of skeletal muscles, neurons, spleens and leukemias.
XFD594 Anti-human CD231 Antibody *B2D, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The B2D monoclonal antibody binds with human CD231, a transmembrane protein frequently found on the surface of skeletal muscles, neurons, spleens and leukemias.
XFD594 Anti-human CD235 Antibody *HIR2, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The BB27 monoclonal antibody binds to human CD101, a 120 kD member of the Ig superfamily commonly found on the surface of T cells, granulocytes and dendritic cells.
XFD594 Anti-human CD101 Antibody *BB27, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The BB27 monoclonal antibody binds to human CD101, a 120 kD member of the Ig superfamily commonly found on the surface of T cells, granulocytes and dendritic cells.
XFD594 Anti-human CD64 Antibody *10.1, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The 10.1 monoclonal antibody binds with human CD64, a 72 kD single-pass type i membrane protein typically expressed on the surface of granulocytes, monocytes and dendritic cells.
XFD594 Anti-human CD64 Antibody *10.1, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The 10.1 monoclonal antibody binds with human CD64, a 72 kD single-pass type i membrane protein typically expressed on the surface of granulocytes, monocytes and dendritic cells.
XFD594 Anti-human CD28 Antibody *9.3, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The 9.3 monoclonal antibody binds with human CD28, a 44 kD transmembrane glycoprotein typically located on the surface of natural killer cells and plasma cells.
XFD594 Anti-human CD28 Antibody *9.3, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The 9.3 monoclonal antibody binds with human CD28, a 44 kD transmembrane glycoprotein typically located on the surface of natural killer cells and plasma cells.
XFD594 Anti-human CD32 Antibody *3D3, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The 3D3 monoclonal antibody binds to human CD32, a 40 kD member of the Ig superfamily often located on the surface of platelets, monocytes, B cells, granulocytes and dendritic cells.
XFD594 Anti-human CD32 Antibody *3D3, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The 3D3 monoclonal antibody binds to human CD32, a 40 kD member of the Ig superfamily often located on the surface of platelets, monocytes, B cells, granulocytes and dendritic cells.
XFD594 Anti-human CD72 Antibody *3F3, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The 3F3 monoclonal antibody binds with human CD72, a 39 - 43 kD transmembrane glycoprotein often located on the surface of B cells, dendritic cells, liver kupffer cells and macrophages.
XFD594 Anti-human CD72 Antibody *3F3, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The 3F3 monoclonal antibody binds with human CD72, a 39 - 43 kD transmembrane glycoprotein often located on the surface of B cells, dendritic cells, liver kupffer cells and macrophages.
XFD594 Anti-human CD73 Antibody *AD2, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The C33 monoclonal antibody binds with human CD82, a 45 - 90 kD member of the 4-span transmembrane protein superfamily often located on the surface of epithelial cells, fibroblasts, endothelial cells and lymphocytes.
XFD594 Anti-human CD82 Antibody *C33, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The C33 monoclonal antibody binds with human CD82, a 45 - 90 kD member of the 4-span transmembrane protein superfamily often located on the surface of epithelial cells, fibroblasts, endothelial cells and lymphocytes.
XFD594 Anti-human CD16 Antibody *3G8, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The 3G8 monoclonal antibody recognizes human CD16a, a 50 - 65 kD transmembrane protein typically found on the surface of macrophages, natural killer cells, dendritic cells, monocytes and neutrophils.
XFD594 Anti-human CD16 Antibody *3G8, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The 3G8 monoclonal antibody recognizes human CD16a, a 50 - 65 kD transmembrane protein typically found on the surface of macrophages, natural killer cells, dendritic cells, monocytes and neutrophils.
XFD594 Anti-human CD40 Antibody *G28.5, XFD594 Same Structure to Alexa Fluor™ 594*
Description: The 4G7 monoclonal antibody binds with human CD19, a 95 kD transmembrane protein commonly expressed on the surface of B cells and lymphocytes.
×
ICELISA na przeciwciało monoklonalne do badania przesiewowego diazynonu w próbkach warzyw
Diazynon (DAZ) to pestycyd fosforoorganiczny (OP), który jest powszechnie stosowany do zapobiegania i zwalczania szkodników zagrażających produktom rolnym. W tym badaniu opracowaliśmy nowatorską strategię powlekania heterologicznego do testu immunologicznego DAZ.
Hapten powlekający DAZ może być bezpośrednio sprzężony z białkiem nośnikowym bez konieczności stosowania ramienia dystansującego. Ta proponowana strategia powlekania haptenem oszczędza czas i znacznie poprawia czułość testu immunologicznego z powodu braku ramienia rozdzielającego. Zsyntetyzowany antygen powlekający w postaci zsyntetyzowanej zastosowano do skriningu przeciwciała monoklonalnego (mAb).
Wreszcie rozwinięty pośredni konkurencyjny check immunoenzymatyczny (icELISA) wykazała układu scalonego 50 , a granica wykrywalności (LOD) wartości 0,58 ng ml -1 i Eight str ml -1 , odpowiednio. Metoda ta wykazywała pomijalną reaktywność krzyżową z innymi analogami, a odzysk próbek (ogórek, kapusta i sałata) wahał się od 92,6% do 125,4%, ze współczynnikami wariancji (CV) poniżej 12%.
Uzyskano dobrą korelację między icELISA a wysokosprawną chromatografią cieczową ze spektrometrią mas (HPLC-MS / MS). Proponowany icELISA był idealnym narzędziem do monitorowania pozostałości DAZ w próbkach żywności.
Odpowiedni środek utrwalający do barwienia MEM-G / 9 hodowanych komórek komórek nowotworowych trofoblastów JEG-Three HLA-G-dodatnich
Ludzki antygen leukocytów (HLA-G) uczestniczy w immunosupresji i jest przydatny w diagnostyce prenatalnej. Podstawą nieinwazyjnych badań prenatalnych jest izolacja komórek płodowych dodatnich pod kątem HLA-G przez skoniugowane z przeciwciałem HLA-G nanocząsteczki z szyjki macicy kobiet w ciąży. Próbki szyjki macicy są utrwalane w pożywce transportowej przed izolacją przy użyciu nanocząstek sprzężonych z przeciwciałami .
Barwienie HLA-G przy użyciu przeciwciała MEM-G / 9 jest jednak ograniczone do nieutrwalonych komórek. Zbadaliśmy wpływ kilku środków utrwalających na interakcję HLA-G z MEM-G / 9 w linii komórkowej HLA-G-dodatniej JEG-3. Zbadaliśmy absolutny metanol, bufor octanowy 1: 1: metanol, roztwór Pap i paraformaldehyd.
Efekty tych utrwalaczy oceniano za pomocą immunofluorescencji. Nie stwierdzono barwienia powierzchni MEM-G / 9 komórek utrwalonych metanolem. Około 40% komórek JEG-Three utrwalonych paraformaldehydem nie wybarwiło się.
Prawie wszystkie komórki barwiono MEM-G / 9 po utrwaleniu buforem octanowym: metanolem lub roztworem Pap. Nasze odkrycia wskazują na znaczenie stosowania odpowiedniego utrwalacza do konserwacji antygenu powierzchniowego komórek HLA-G do badań z użyciem przeciwciała MEM-G / 9 .
Produkcja w Escherichia coli rekombinowanych fragmentów białek wypustek COVID-19 połączonych z CRM197
W 2020 roku pandemia COVID-19 dotknęła prawie 10 8 osób. W związku z tym opracowano całkiem sporo szczepionek przeciwko COVID-19, a kilka ostatnio otrzymało zezwolenie na użycie w nagłych wypadkach. Ogólnie rzecz biorąc, szczepionki te są ukierunkowane na określone białka wirusowe przez przeciwciała, których synteza jest bezpośrednio lub pośrednio wyzwalana przez kwasy nukleinowe kodujące pożądane cele.
Wśród tych celów, domena wiążąca receptor (RBD) białka wypustek COVID-19 (SP) często występuje w repertuarze kandydatów na szczepionki. Jednak immunogenność RBD per se jest ograniczona przez jego niską masę cząsteczkową i strukturalną rearanżację SP o pełnej długości, której towarzyszy oderwanie RBD.
Tutaj pokazujemy, że RBD COVID-19 SP można dogodnie wytworzyć w Escherichia coli po fuzji z fragmentem CRM197, wariantu toksyny błonicy obecnie stosowanej w wielu skoniugowanych szczepionkach.
W szczególności pokazujemy, że chimera CRM197-RBD solubilizowana z ciałek inkluzyjnych może zostać ponownie sfałdowana i oczyszczona do stanu obejmującego 5 natywnych wiązań dwusiarczkowych białek macierzystych, zdolność wiązania enzymu konwertującego angiotensynę 2 i zadowalającą stabilność w pomieszczeniu. temperatura. W związku z tym nasze obserwacje dostarczają obowiązkowych informacji do opracowania potencjalnej szczepionki skierowanej przeciwko COVID-19.
Szlak GluN2B-BDNF w jądrze kontaktującym się z płynemowo-rdzeniowym pośredniczy w bólu neuropatycznym w urazem nerwu u szczurów
Niniejsze badanie miało na celu zbadanie roli szlaku GluN2B-BDNF w jądrze kontaktującym się z płynem mózgowo-rdzeniowym (CSF-CN) w bólu neuropatycznym. Do znakowania CSF-CN zastosowano dokomorowe wstrzyknięcie do komory podjednostki B toksyny cholery sprzężonej z peroksydazą chrzanową (CBHRP). Do obserwowania ekspresji GluN2B i BDNF w CSF-CN zastosowano podwójnie znakowane barwienie immunofluorescencyjne i technikę Western blot. Mannequin szczurzego nerwu kulszowego (CCI) z przewlekłym urazem zaciskowym zastosowano do odtworzenia bólu neuropatycznego.
Oceniano ból w celu określenia działania przeciwbólowego antagonisty GluN2B Ro 25-6981 i przeciwciała neutralizującego BDNF na szczury CCI. GluN2B i BDNF ulegały ekspresji w CSF-CN, a ich ekspresja była podwyższona u szczurów CCI. Wstrzyknięcie do komory bocznej antagonisty GluN2B Ro 25-6981 lub przeciwciała neutralizującego BDNF w znacznym stopniu złagodziło przeczulicę termiczną i alodynię mechaniczną u szczurów CCI. Ponadto zwiększona ekspresja białka BDNF u szczurów CCI została odwrócona przez śródboczne wstrzyknięcie Ro 25-6981 do komory. Wyniki te sugerują, że GluN2B i BDNF ulegają ekspresji w CSF-CN, a zmiana szlaku GluN2B-BDNF w CSF-CN jest zaangażowana w modulację obwodowego bólu neuropatycznego.