Opracowanie karty testowej opartej na paskach immunochromatograficznych ze złota koloidalnego do szybkiego wykrywania przeciwciał przeciwko Theileria equi i Babesia caballi

Piroplazmoza koni (EP) jest poważnym problemem w przemyśle koni, a kontrolowanie EP ma kluczowe znaczenie dla międzynarodowego handlu końmi. EP jest wywoływany przez dwa pierwotniaki apikompleksowe, Theileria equi i Babesia caballi. Szybkie i dokładne metody, które są odpowiednie do wykrywania tych pasożytów w terenie, mają kluczowe znaczenie dla kontroli infekcji i rozprzestrzeniania się EP. W tym badaniu opracowaliśmy kartę do wykrywania przeciwciał przeciwko T. equi i B. caballi w oparciu o dwa paski immunochromatograficzne ze złota koloidalnego zgodnie z zasadą podwójnego antygenu kanapkowego. Białka equi merozoite antigen 1 (EMA1) i białko rhoptry BC48 są powszechnie stosowane jako antygeny diagnostyczne odpowiednio przeciwko T. equi i B. caballi. Na pasku jako detektor zastosowano oczyszczone białko EMA1 lub BC48 znakowane złotem koloidalnym,

Protokół trwa od 10 do 15 minut i nie wymaga specjalistycznego sprzętu ani odczynników chemicznych, a jeden test może wykryć dwa patogeny EP na jednej karcie. Testy swoistości potwierdziły brak reaktywności krzyżowej z surowicami dodatnimi dla powszechnych patogenów koni. Używając komercyjnego konkurencyjnego zestawu enzymatycznego testu immunosorpcyjnego (cELISA) do porównania, za pomocą karty przebadano 476 próbek klinicznych. Współczynniki koincydencji wyniosły odpowiednio 96,43% i 97,90% dla T. equi i B. caballi. Informacje zwrotne z prób terenowych były jednolicie pozytywne, co sugeruje, że to narzędzie diagnostyczne może być przydatne do kontrolowania rozprzestrzeniania się T. equi i B. caballi.

Końska piroplazmoza (EP), wywoływana przez Theileria equi i Babesia caballi, jest poważną chorobą przenoszoną przez kleszcze u koni, która występuje w większości części świata. EP jest uważana za chorobę podlegającą zgłoszeniu przez Światową Organizację Zdrowia Zwierząt (OIE). Dokładna diagnoza i różnicowanie T. equi i B. caballi są bardzo ważne dla zapobiegania, kontroli i leczenia EP. Dlatego opracowaliśmy test immunochromatograficzny z podwójnym antygenem kanapkowym ze złotem koloidalnym (GICG) do wykrywania T. equi i B. caballi. Dwa paski GICG złożono obok siebie na jednej karcie do wykrywania T. equi i B. caballi, a dwa patogeny EP można było wykryć w jednym teście. Metoda ta była prosta, szybka i specyficzna dla wykrywania EP; dlatego w porównaniu z poprzednimi metodami ta metoda jest bardziej odpowiednia do diagnostyki patogenów w terenie.